Repository of DUTH

The alterations of signaling profiling of CD4+ T lymphocytes in women with recurrent spontaneous abortions under treatment with lymphocyte immunotherapy (LIT) (Master thesis)

Κορδέλλα, Χρυσούλα

Οι αλλαγές τις οποίες υφίσταται το ανθρώπινο ανοσοποιητικό σύστημα κατά τη διάρκεια μίας κύησης και ο πιθανός ρόλος αυτού στις επαναλαμβανόμενες αποβολές αποτελεί κύριο πεδίο έρευνας τα τελευταία χρόνια. Ως επαναλαμβανόμενες ή καθεξίν αποβολές ορίζονται οι, τουλάχιστον τρείς, διαδοχικές απώλειες εμβρύων, από κυήσεις μικρότερων των 20 εβδομάδων, ενώ η κύρια αίτια αυτών παραμένει αδιευκρίνιστη. Κυτταρικοί πληθυσμοί τόσο της έμφυτης όσο και της προσαρμοστικής ανοσίας φαίνεται να εμπλέκονται στον γυναικείο ανοσοποιητικό, επιτρέποντας την επιτυχή ανάπτυξη μιας κύησης. Ιδιαίτερα σημαντικό ρόλο φαίνεται πως διαδραματίζουν τα CD4+ FoxP3+ Τ ρυθμιστικά κύτταρα (Tregs), ο πληθυσμός των οποίων βρέθηκε μειωμένος σε περιπτώσεις επαναλαμβανόμενων αποβολών. Ωστόσο, ο ρόλος των T βοηθητικών λεμφοκυττάρων στις καθεξίν αποβολές δεν έχει μελετηθεί. Στην εργασία αυτή, θα μελετηθεί το σηματοδοτικό προφίλ JAK-STAT των CD4+ Τ κυττάρων. ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΙΑ. Μονοπύρηνα κύτταρα συλλέχθηκαν από τριάντα μία (n=31) γυναίκες και από δεκατρείς υγιείς γυναίκες (n=13) της ίδιας ηλικίας με τουλάχιστον μία επιτυχή εγκυμοσύνη, ενώ παράλληλα καταγράφηκαν κλινικά χαρακτηριστικά των γυναικών αυτών. Πραγματοποιήθηκε μέτρηση των βασικών και μετά από διέγερση με IL-6, IFNα ή/και IL-2 επιπέδων των φωσφορυλιωμένων μορίων STAT1, STAT3 και STAT5 με φωσφοειδική κυτταρομετρία ροής. Οι στατιστικές αναλύσεις έγιναν με τις δοκιμές MannWhitney ή WilcoxonSigned-Rank κατά περίπτωση. Για την ομαδοποίηση των σηματοδοτικών προφίλ αξιοποιήθηκε μη επιβλεπόμενη ιεραρχική ταξινόμηση. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ. Το ποσοστό των Τ βοηθητικών κυττάρων δε διέφερε ανάμεσα στις γυναίκες με επαναλαμβανόμενες αποβολές και εκείνες με φυσιολογική κύηση, δείχνοντας ότι μάλλον η ποσότητα των Τ βοηθητικών κυττάρων δεν επηρεάζει άμεσα την έκβαση μιας κύησης. Ωστόσο, σημαντικές διαφορές ανάμεσα στις δύο αυτές ομάδες εντοπίστηκαν στο σηματοδοτικό προφίλ των μορίων STAT. Πιο συγκεκριμένα, οι γυναίκες με επαναλαμβανόμενες αποβολές εμφανίζουν μειωμένα επίπεδα των διεγερμένων μορίων pSTAT1 και pSTAT3, υποστηρίζοντας ότι ο πληθυσμός των CD4+ T κυττάρων στις περιπτώσεις καθεξίν αποβολών εμφανίζει μειωμένη αποκρισιμότητα στις κυτταροκίνες. Διαφορές στην κυτταρική σηματοδότηση εντοπίστηκαν και στην ομάδα των γυναικών με καθεξίν αποβολές, με τις γυναίκες που πέτυχαν τελικά κύηση μετά από θεραπεία LIT να εμφανίζει αυξημένα βασικά επίπεδα των σηματοδοτικών μορίων STAT. ΣΥΖΗΤΗΣΗ. Τα αποτελέσματα της συγκεκριμένης έρευνας υποδεικνύουν συμμετοχή τόσο των Τ βοηθητικών κυττάρων όσο και του σηματοδοτικού μονοπατιού JAK-STAT στη διακοπή ή όχι μιας κύησης. Η διεξαγωγή λειτουργικών πειραμάτων μπορεί να φωτίσει καλύτερα τον ακριβή ρόλο των Τ κυττάρων στις καθεξίν αποβολές.